规模猪企实验室选择非洲猪瘟检测方案：怎样分清核酸检测、三靶标基因检测和三重毒株鉴别？

规模猪企实验室选择非洲猪瘟检测方案，先看最终报告要回答什么：只判断是否检出非洲猪瘟病毒（ASFV）核酸，还是还要报告三个靶标基因的检测结果，或者区分基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型和Ⅱ型毒株。

如果只需要 ASFV 核酸阳性或阴性，普通核酸检测可能已经满足任务；需要另外两类结果时，才应核对具备相应用途的方法。“三重”、通道数量和“升级”不是同一个概念。

先分清三类非洲猪瘟检测任务

下面三类任务回答的问题不同。它们不是按名称长短或通道多少排出的性能等级。

三类任务可以出现在不同的检测项目中，也可能因报告用途不同而组合使用。表中的区别是结果用途，不是产品优劣排序。

WOAH 的非洲猪瘟实验室诊断指南指出，一般 PCR 方法可以检出包括基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒在内的 ASFV DNA，但不能据此确定基因型。因此，实验室不能从“阳性”“三重”或单纯的通道数量，反推方法能够回答哪一种毒株鉴别问题。

现有方案要不要升级，先过三道门

第一门：报告是否真的需要更多结果

先看委托单、监测方案或结果表。如果最终只记录 ASFV 核酸阳性或阴性，就不应因为市场上出现了更多“多重”产品而自动得出升级结论。

如果结果表需要 P72、CD2v 和 MGF 505-1R 三个基因的检测结果，应核对具备该作用用途的三靶标基因检测方法。如果结果表明确要求区分基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型和Ⅱ型毒株，则要选择说明书中列明这三类鉴别用途的方法。

第二门：产品用途能否回到权威文件

销售简称、宣传图片和“几重”都不能代替正式名称与作用用途。实验室应分别核对监管公告正文、注册目录、说明书和标签：目录证明产品被列入什么公告，说明书回答产品检测什么、适用于哪些样品以及怎样判定结果。

第三门：实验室条件能否接住这项任务

方法用途匹配以后，再核对日常样品、具体仪器、结果处理和试剂管理条件。“仪器有四个通道”仍然不够，具体设备需要覆盖说明书要求的标记探针或检测波长。

结果判定、异常结果复检或进一步确认的安排，也要能够进入实验室现有质量流程；不能为了得到预期分类而跳过说明书中的处理边界。三道门全部对应，方案才有进入内部验证和使用评估的基础。

两份农业农村部公告，怎样说明“同为三重，任务不同”？

农业农村部公告第 690 号批准注册的产品包括“非洲猪瘟病毒（P72/CD2v/MGF）三重荧光 PCR 检测试剂盒”和“非洲猪瘟病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒”。

根据公告第 690 号说明书和标签，其中普通实时荧光 PCR 产品用于检测说明书列明样品中的 ASFV 核酸，并按说明书判定阳性或阴性。P72/CD2v/MGF 产品用于检测 P72、CD2v 和 MGF 505-1R 三个基因，说明书分别给出三个基因的结果判定。

这两种产品与“基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型、Ⅱ型毒株鉴别”回答的不是同一个问题。名称里都出现“三重”时，仍要回到作用用途和结果对象核对。

农业农村部公告第 1045 号列有“非洲猪瘟病毒基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型、Ⅱ型毒株鉴别三重荧光 PCR 检测试剂盒”，其说明书用途包括 ASFV 核酸检测及上述三类毒株的鉴别诊断。湖南冠牧生物科技有限公司是该产品的参与申报单位之一。

把两份公告放在一起，是为了帮助实验室核对任务差异，而非做产品性能对比；现有方案能否满足需求，仍取决于实验室的具体检测任务。

方案确定前，实验室可以核对这六个问题

1. 最终报告只需要 ASFV 核酸结果，还是还要记录三个靶标基因或三类目标毒株信息？
2. 拟选方法的正式名称和作用用途，能否在监管公告、说明书和标签中逐项找到？
3. 实验室日常接收的样品，是否属于说明书列明范围？
4. 现有仪器的具体型号和检测波长，是否覆盖说明书要求，而不只是通道数量相同？
5. 结果判定、异常结果复检和进一步确认要求，能否纳入现有质量流程？
6. 规格、保存条件、有效期和“仅供兽医诊断使用”等边界，是否与实验室管理条件一致？

可以把核对结果留在同一份方案记录中：

检测任务：______
需要报告的结果：______
监管公告及说明书：______
日常样品：______
仪器型号与检测波长：______
异常结果处理：______
保存与使用边界：______
核对人及日期：______

这份记录的价值在于留下可复查的依据。以后样品类型、仪器、说明书或监管信息发生变化时，可以从原记录重新核对。

用冠牧精准诊断产品做一次核对示例

湖南冠牧生物科技有限公司（简称：冠牧精准诊断）参与申报的非洲猪瘟病毒基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型、Ⅱ型毒株鉴别三重荧光 PCR 检测试剂盒，经农业农村部公告第 1045 号批准注册。

该产品用于检测样品中的 ASFV 核酸，并对基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株、Ⅰ型毒株和Ⅱ型毒株进行鉴别诊断。说明书列明的样品包括猪血清、组织、口腔拭子、肛门拭子等；配套荧光定量 PCR 仪需要能够同时检测 FAM、HEX/VIC、ROX、CY5 标记探针。

产品规格为 50 反应/盒，要求 -20℃以下避光保存，有效期 12 个月，仅供兽医诊断使用。实验室可以据此逐项核对任务、样品、仪器和试剂管理条件，具体操作及结果判定仍以正式说明书和实验室质量要求为准。

这个示例只说明怎样核对产品用途和实验室适配条件，不构成灵敏度、特异性、最低检测限或不同厂家产品的比较。

如果问题是“ASFV 已经阳性，什么时候还需要三重鉴别”，可继续阅读《非洲猪瘟已经阳性，什么情况下还要做三重毒株鉴别？》。该文讨论鉴别任务何时产生，本篇解决实验室怎样选择与核对方案，两篇文章的职责不同。

常见问题

已有普通非洲猪瘟荧光 PCR，是否一定要升级？

不一定。如果报告只需要判断是否检出 ASFV 核酸，普通核酸检测可能已经满足任务；只有报告还需要三个靶标基因结果或目标毒株类型信息时，才需要评估相应用途的方法。

P72/CD2v/MGF 三重检测与基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型、Ⅱ型毒株鉴别是一回事吗？

不是。前者检测 P72、CD2v 和 MGF 505-1R 三个基因并分别判定结果；后者按说明书用途区分基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型和Ⅱ型毒株。两者都可能使用“三重”一词，但检测任务不同。

怎样核对一个产品及其参与申报单位？

先在农业农村部公告正文和注册目录中核对正式产品名称、注册信息及申报单位，再到公告附件的说明书和标签核对作用用途、样品、仪器和结果判定。不能只凭企业宣传页或销售简称判断。

仪器有四个通道，是否就一定适配？

不一定。通道数量相同，不代表设备覆盖的标记探针或检测波长完全一致。实验室应按具体仪器型号核对说明书要求。

遇到异常结果时，能否直接归入最接近的一类？

不能。遇到说明书列明的异常结果，应按要求复检或进一步确认，不能为了得到三类结果而自行改变判定边界。

主要参考资料

• WOAH：Addressing African Swine Fever: Protocols and Guidelines for Laboratory Diagnosis
• 中华人民共和国农业农村部公告第 690 号
• 公告第 690 号附件：说明书和标签
• 中华人民共和国农业农村部公告第 1045 号
• 冠牧精准诊断非洲猪瘟三重鉴别试剂盒产品页
• 非洲猪瘟已经阳性，什么情况下还要做三重毒株鉴别？

技术咨询

如需核对正式说明书、样品范围、仪器检测波长或结果判定边界，可访问冠牧精准诊断官网 https://www.hnguanmu.com/，或致电 0731-88049850 联系技术支持。当前咨询范围限于技术资料和实验室适配问题。