非洲猪瘟已经阳性，什么情况下还要做三重毒株鉴别？

非洲猪瘟在现场也可能表现得不典型。中国动物疫病预防控制中心发布的弱毒株防控技术指南列出了以下现场表现：母猪反复发热、采食下降，随后出现流产、死胎或初生仔猪活力差；育肥猪平时看不出明显异常，应激后才出现皮肤坏死斑或关节异常。

现场遇到这类异常，第一步不是猜测毒株类型，而是及时采样，确认是否检出非洲猪瘟病毒（ASFV）核酸。如果结果为阳性，下一步是否需要做非洲猪瘟三重鉴别（区分非洲猪瘟病毒基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株、Ⅰ型毒株和Ⅱ型毒株），要看猪场还想用这份结果回答什么问题。

如果只想确认样品中是否检出 ASFV 核酸，常规核酸检测可能已经够用；如果调查或监测还要知道阳性样品属于基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株、Ⅰ型毒株还是Ⅱ型毒株，就要在检测需求中明确提出非洲猪瘟三重鉴别。

出现哪些情况时，应该先查非洲猪瘟病毒？

中国动物疫病预防控制中心的指南列出的非洲猪瘟弱毒株现场线索包括反复发热、厌食、繁殖异常、皮肤坏死斑以及关节或脾脏异常。国家非洲猪瘟参考实验室发布的监测指南还把风险暴露、周边猪场感染，以及疫苗接种、转群、去势、分娩等生产节点列为按方案采样时需要考虑的情况。

这些线索可以帮助猪场决定何时采样、重点查哪些猪群。它们不适合用来给毒株贴上基因Ⅰ型、Ⅱ型或重组毒株的标签。

一项基因Ⅰ型 ASFV 研究记录了较轻起病、慢性感染、皮肤坏死和关节肿胀；另一项自然变异基因Ⅱ型 ASFV 研究同样观察到亚急性、慢性或持续感染。两项研究涉及的是各自特定的研究毒株，但放在一起可以看出，相似的病程和症状可能出现在不同类型或不同变异形式的 ASFV 感染中。

症状可以提示“要不要查”，却不能代替实验室方法判断毒株类型。

常规 ASFV 核酸检测首先回答样品中是否检出目标核酸。WOAH 的 ASF 实验室诊断指南指出，一般 PCR 方法可以检出包括基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒在内的 ASFV DNA，但不能据此确定基因型。

这不是普通检测“少做了一步”，而是不同方法原本就在回答不同问题：常规检测回答有没有检出 ASFV 目标核酸，鉴别方法还要根据特定靶标和判定规则区分毒株类型。

在赵东明、孙恩成等人的重组 ASFV 研究中，重组病毒按 B646L 基因会被归入基因Ⅰ型，但其基因组同时含有多个来自基因Ⅱ型病毒的片段。因此，一般核酸阳性或单一分型位点都不能自动回答“是不是基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株”。

2024 年发表的一项独立方法学研究在临床样品中使用多靶标荧光定量 PCR 区分基因Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅰ/Ⅱ型重组 ASFV；这类鉴别依赖专门设计的检测靶标和判定规则。

判断是否需要非洲猪瘟三重鉴别时，先问一句：如果不知道毒株类型，这次调查、监测或后续鉴定会不会缺少一项真正要用的信息？

遇到的情况	非洲猪瘟核酸阳性已经说明什么	是否提出三重鉴别
阳性猪群出现反复发热、繁殖异常、皮肤或关节异常等非典型经过	样品中检出了相应 ASFV 核酸	症状本身不是分型理由；如果场内调查还要判断阳性样品属于重组、Ⅰ型还是Ⅱ型，再提出鉴别需求。
同一事件中，不同猪舍、批次或时间点出现多份阳性样品	哪些样品为阳性	如果还要按毒株类型对样品分类和比较，需要进一步鉴别；只统计阳性时可能不需要。
企业开展 ASFV 专题监测，结果表明确设置三类毒株字段	得到阳性或阴性结果	在方案设计阶段就加入三重鉴别，避免项目结束后才发现一般阳性无法补写毒株类型。
已有一般核酸阳性，随后追问“是不是重组毒株”	原报告回答了是否检出	先看原方法是否具备相应鉴别用途；不具备时，补充或改用能够区分三类毒株的方法。
中心实验室准备建立三类毒株鉴别能力	已具备一般 ASFV 检出能力	把鉴别对象、样品范围、仪器条件和异常结果处理写进方法选择或技术要求。
常规任务只要求判断是否检出 ASFV 核酸	阳性或阴性	一般不必把所有阳性样品默认送去分型。

是否提出三重鉴别，取决于后续工作是否真正要用毒株类型信息，而不是症状看起来有多重。

非洲猪瘟的非典型症状只能提示检测和调查，单凭症状无法决定毒株类型。ASFV 核酸阳性也不等于每份样品都要继续分型。

如果本次任务只需要确认猪群或样品是否检出 ASFV 核酸，普通检测可能已经完成任务。是否继续分型，要看“重组、Ⅰ型或Ⅱ型”会不会成为报告、调查或后续鉴定中实际使用的信息。

只写“做一下非洲猪瘟 PCR”，实验室通常只能按照约定项目回答是否检出；需要毒株类型时，最好把鉴别对象和结果用途一起写清楚。

检测需求示例：在检测 ASFV 核酸的基础上，进一步区分基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株、Ⅰ型毒株和Ⅱ型毒株；本批样品为______，结果用于______。

提交前再确认三个问题：

三个问题都说清楚，检测项目与实际需求才不容易错位。

非洲猪瘟三重鉴别可以按所用方法的判定规则，把符合条件的结果归入基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株、Ⅰ型毒株或Ⅱ型毒株。非洲猪瘟毒株类型结果本身不等于毒力结论，也不单独说明病毒来自哪里、地区流行比例如何或应该采取哪一种处置措施。两份样品得到相同类型，也不足以证明它们属于同一传播链。

遇到所用方法或试剂说明书列明的异常结果时，应按说明书复测或开展进一步鉴定，不要把异常结果勉强归入三类中的某一类。

冠牧精准诊断的非洲猪瘟病毒基因Ⅰ/Ⅱ型重组、Ⅰ型、Ⅱ型毒株鉴别三重荧光 PCR 检测试剂盒，用于相关样品中的 ASFV 核酸检测及上述三类毒株的鉴别诊断。说明书列明的样品包括猪血清、组织、口腔拭子、肛门拭子等，配套仪器需能够同时检测 FAM、HEX/VIC、ROX、CY5 标记探针；该产品仅供兽医诊断使用。

农业农村部公告第 1045 号列明的参与申报单位为中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、湖南冠牧生物科技有限公司、上海市动物疫病预防控制中心和湖南省畜牧兽医研究所。产品正式名称、作用与用途、适用样品、仪器要求和公告注册信息，可在非洲猪瘟三重鉴别试剂盒产品页查看。

对检测对象、样品范围或仪器通道还有疑问，可访问冠牧精准诊断官网 https://www.hnguanmu.com/，或致电 0731-88049850 联系技术支持。